12:26 م المكتبة الزراعية الشاملة

كتاب : دليل تقانات زراعة الأنسجة النباتية : النظرية و التطبيقية

عدد صفحات الكتاب : 231 صفحة

زراعة الأنسجة هي تقنية متطورة لإكثار النباتات ، حيث يتم زراعة عدد قليل من أنسجة النباتات في بيئة صناعية خاضعة للرقابة في ظل ظروف معقمة كاملة. تم تقديم مفهوم القدرة الكاملة (قدرة الخلايا النباتية على التجدد إلى نبات كامل) وزراعة الأنسجة لأول مرة من قبل عالم النبات الألماني جوتليب هابرلاند في عام 1902. ولهذا السبب يُعرف أيضًا باسم أبو زراعة الأنسجة. في عام 1904 ، عزل هانينج أجنة صليبية ونجح في زراعتها على الأملاح المعدنية ومحاليل السكر. منذ ذلك الحين ، تم تحسين هذه التقنية وتطويرها بعدة طرق مختلفة.

تم تطوير وسائط مغذيات اصطناعية مختلفة لدعم نمو وتطور النباتات في المختبر ، مثل وسائط MS ووسائط Gamborg ووسط Linsmaier و Skoog (LS) و White’s Medium. علاوة على ذلك ، تُستخدم الهرمونات النباتية الاصطناعية للحث على تطوير أعضاء أسرع وسليم للنباتات المختبرية. زراعة الأنسجة هي من أنواع مختلفة بناءً على نوع النبات المستأصل (قطعة من النبات أو الأنسجة) المستخدمة في العملية. ويشمل:

زراعة الكالس: الكالس عبارة عن كتلة غير متمايزة من الخلايا. يتم الحصول عليها عند زراعة النباتات المستأصلة في بيئة صناعية خاضعة للرقابة تؤدي لاحقًا إلى تكوين أعضاء نباتية.

زراعة الأعضاء: في هذه الطريقة ، تتم زراعة أي عضو من أعضاء النبات ، بما في ذلك الجذع أو الجذر أو الأوراق ، في حالة اصطناعية. يتم استخدامه للحفاظ على هيكل ووظائف النبات المطلوب.

زراعة المريستيم: في هذه الطريقة ، تتم زراعة النسيج الإنشائي للنباتات في حالة اصطناعية. يفضل في حالات القضاء على المرض.

زراعة الأجنة: تستخدم هذه الطريقة أجنة النباتات التي يتم تعقيمها وتربيتها على أوساط استنبات مناسبة لتنمية النبات.

استزراع البروتوبلاست: في هذه الطريقة ، يتم جمع البروتوبلاست من أجزاء النبات وتربيتها أولاً لتطوير جدار الخلية وتمايز الأنسجة ، والذي يتبعه مجددًا تجديد النبات.

زراعة البذور: هنا ، تُزرع البذور على وسط صناعي لتجديد النبات.

تحتوي زراعة الأنسجة على مجموعة واسعة من التطبيقات ، بدءًا من الهندسة الوراثية إلى الزراعة. ألق نظرة على بعض استخداماته:

إنتاج المنتجات الثانوية من نمو الخلايا النباتية على نطاق واسع في الثقافة السائلة.

يمكن التغلب على حواجز ما قبل اللاقحة وما بعد اللاقحة باستخدام تقنيات الإخصاب في المختبر أو زراعة الأجنة أو البويضات أو اندماج البروتوبلاست.

الإخصاب في المختبر هو تقنية مفيدة تسهل التهجينات الجينية بين الأنواع وداخلها. هذا يساعد في التغلب على عدم التوافق الفسيولوجي الذي يحدث أثناء التكوين الهجين.

زراعة الأجنة هي تقنية مفيدة للتغلب على إجهاض الأجنة ، وانخفاض مجموعة البذور ، وسكون البذور ، وبطء إنبات البذور ، وتحفيز نمو الجنين في حالة عدم وجود شريك تكافلي ، وإنتاج أحاديات الشعير.

اندماج البروتوبلاست هو أفضل تقنية لإنتاج أنواع هجينة من النباتات ، والتي ببساطة لا يمكن إنتاجها باستخدام التقنيات التقليدية.

توفر الأحاديات المفردة المضاعفة في المختبر الوقت والتكلفة عندما يتعلق الأمر بإنتاج سلالات متماثلة اللواقح ذات كفاءة عالية ، مقارنة بالطرق الأخرى.

استخدم القفازات والمعدات المعقمة لكل هذه الخطوات.

ضع المادة النباتية في حاوية تعقيم الكلوروكس المبيضة ، وحاويات الماء المعقم ، والملقط والشفرات المعقمة ، وبعض المناشف الورقية المعقمة لاستخدامها كسطح قطع وأنابيب كافية تحتوي على وسط معقم في حوض السمك المعقم. يجب رش الأسطح الخارجية للحاويات والأنابيب المغطاة والإمدادات المغلفة بالألمنيوم لفترة وجيزة بنسبة 70٪ كحول قبل نقلها إلى الحجرة. يمكن رش القفازات بمحلول كحول 70٪ وفرك اليدين معًا لنشر الكحول قبل وضع اليدين في الحجرة. بمجرد ارتداء القفازات ورشها ، يجب ألا يلمس الطلاب أي شيء خارج الغرفة المعقمة.

افتح الحاوية مع المادة النباتية بعناية واسكب ما يكفي من الماء المعقم حتى نصف الحاوية. استبدل الغطاء ورج الحاوية برفق لغسل قطع المناديل (إإكسبلنتس) جيدًا لمدة 2-3 دقائق لإزالة المبيض. اسكب الماء وكرر عملية الغسيل 3 مرات أخرى.

قم بإزالة المادة النباتية المعقمة من الماء المعقم ، ضعها على منديل ورقي أو طبق بتري معقم. قطع القرنبيط إلى قطع أصغر بعرض 2 إلى 3 مم. في حالة استخدام الورد ، قم بقطع قطعة من الساق بطول 10 مم بواسطة برعم متصل. يمكن تقطيع أوراق البنفسج الأفريقي إلى مربعات صغيرة بعرض حوالي 1-1.5 سم. تأكدي من تجنب أي نسيج تضرر بالمبيض ، والذي يظهر من خلال لونه الشاحب.

خذ مقطعًا مُجهزًا من المواد النباتية في ملقط معقم وضعه في الوسط في أنبوب البولي كربونات. يجب غمر قطع القرنبيط جزئيًا في الوسط ، مع توجيه برعم الزهرة لأعلى. يجب وضع وردة أو قصاصات أخرى بحيث يتم إدخال حوالي 4-5 مم عند قاعدة القطع في الوسط بحيث تظل منتصبة ، بحيث يكون البرعم متجهًا لأعلى. يجب وضع قطع أوراق البنفسج الأفريقي مباشرة على السطح المتوسط. استبدل الغطاء بإحكام على الأنبوب.

زراعة النباتات

يمكن وضع الأنابيب التي تحتوي على أقسام نباتية في منطقة مضاءة جيدًا في الفصل الدراسي على الرغم من عدم تعرضها لأشعة الشمس المباشرة. من المحتمل أن تنمو البراعم بسرعة أكبر إذا تم وضع النباتات المستأصلة تحت الفلورسنت أو مصابيح النمو لتوفير 12 ساعة على الأقل من الضوء يوميًا. يمكن استخدام الحوض كغرفة نمو بإضاءة علوية تبلغ 20-25 سم (8-10 بوصات). وهذا سيساعد أيضًا في الحفاظ على درجة حرارة أكثر انتظامًا ودفئًا. تأكد من أن درجة الحرارة لا تزيد عن 28 درجة مئوية. جديد يجب أن تتطور البراعم في غضون أسبوعين ، ويجب أن تتقدم جيدًا في غضون 3 إلى 4 أسابيع. افحص الأنابيب يوميًا وتخلص من أي علامات تلوث (قبل التخلص منها ، قم أولاً بتعقيمها في قدر الضغط أو أضف مادة التبييض في الأنبوب).

يمكن أن تظهر الجذور في غضون 6 أسابيع على القرنبيط. يجب نقل الوردة أو البنفسج الأفريقي أو أي قصاصات أخرى إلى وسط تجذير حتى تنمو الجذور بشكل صحيح. يجب إجراء هذا النقل إلى وسيط التجذير الثاني تحت نفس الظروف المعقمة كما في بداية الثقافة. يجب إعداد جميع المعدات اللازمة وحوض السمك كما كان من قبل وتعقيمها بشكل صحيح.

العمل داخل غرفة الحوض المعقمة ، قم بإزالة الغطاء من أنبوب الثقافة. عادة ما يكون هناك العديد من البراعم التي نشأت من كل نبات نباتي. يجب فصل هذه البراعم بعناية عن طريق إزالة النبات كله بلطف من الوسط باستخدام ملقط معقم ثم فصل البراعم عن طريق سحبها برفق باستخدام زوجين من الملقط. يجب بعد ذلك وضع كل لقطة في أنبوب وسط تجذير ويتم دفع الجزء السفلي من اللقطة إلى الوسط بحيث يتم إجراء تلامس جيد. يتم استبدال الغطاء ثم يُسمح للبراعم بالنمو كما في الخطوة 1 حتى تتشكل الجذور ، عادةً في غضون 2-3 أسابيع....

-------------------

تنزيل الكتاب

---------------------------

 

مشاركة