1:58 م
رسائل و أطاريج جامعية -
علم الحشرات
مذكرة: الكشف الجزيئي لفيروسات نحل العسل المنقولة بواسطة الفاروا ودور بعض المستخلصات النباتية في تحفيز الجهاز المناعي لنحل العسل
هدفت الدراسة إلى الكشف عن فيروسات نحل العسل المنتشرة في سوريا ، ومعرفة دور بعض المستخلصات النباتية في تحفيز الجهاز المناعي لنحل العسل (Apis mellifera). وشمل المسح 35 منحلًا من ثماني محافظات سورية (دمشق ، ريف دمشق ، القنيطرة ، السويداء ، حمص ، حماة ، طرطوس واللاذقية). تم جمع 240 عينة من نحل العسل (180 عينة نحل مصحوبة بأعراض ، 60 عينة نحل بدون أعراض) و 35 عينة من Varroa (Varroa Destructor) خلال شهري مارس وأكتوبر من العام (2014 إلى 2017). تم استخدام مجموعة من البادئات المتخصصة للكشف عن فيروسات نحل العسل الأكثر شيوعًا في جميع أنحاء العالم.
في سوريا ، تم اكتشاف فيروسات نحل العسل الأربعة ، فيروس الجناح المشوه (DWV) ، فيروس شلل النحل الحاد (ABPV) ، فيروس Sacbrood (SBV) ، فيروس شلل النحل المزمن (CBPV) بواسطة تفاعل النسخ العكسي البوليميراز المتسلسل (RT-PCR) . كانت نسبة الإصابة 88.73٪ ، 15.42٪ ، 10.42٪ ، 7.5٪ على التوالي. كان DWV الأكثر انتشارًا في جميع المحافظات الثماني ، يليه ABPV كان منتشرًا في دمشق ، المرجع دمشق ، حمص وحماة ، ثم CBPV كان منتشرًا في دمشق ، المرجع دمشق ، وحمص. أخيرًا ، كان تأثير SBV سائدًا في حمص وحماة. تظهر شجرة النشوء والتطور عدم وجود تأثير الجغرافي في توزيع العزلات المحلية من DWV و CBPV ، بينما كان للتباين الجغرافي دور واضح في توزيع العزلات المحلية والعالمية من ABPV و SBV.
كان حجم جينوم العزلة السورية من DWV 10.165 نيوكليوتيدات (nt). بلغت نسبة الأدينين 29.4٪ ، السيتوزين 15.9٪ ، الجوانين 22.5٪ ، اليوراسيل 32.1٪. كان الجينوم يحتوي على إطار قراءة مفتوح واحد (ORF) (8.682 nt) لترميز متعدد البروتين (2.2892 حمض أميني) محاط بمنطقتين غير مترجمتين 5 '(5' UTR) (1،144 nt) ، و 3 '(3' UTR) (312 nt) ) متبوعًا بـ poly A-tail. تم تحديد عشرة مواقع للبروتياز داخل ORF. أظهرت شجرة النشوء والتطور للجينوم بأكمله تطابقًا كبيرًا بين العزلة السورية والعزلات العالمية من DWV ، ودلت على أن العزلة السورية اتبعت النوع A.
أعلى نسبة إصابة مزدوجة كانت 16.7٪ (40 عينة) عند الإصابة بـ (DWV + ABPV) وأقل نسبة كانت 0.8٪ (عينتان) عند الإصابة بـ (CBPV + SBV). بينما تراوحت أعلى نسبة إصابة ثلاثية من 0.8٪ (عينتان) عند الإصابة بـ (ABPV + CBPV + SBV) إلى 5.4٪ (13 عينة) عند الإصابة بـ (DWV + ABPV + CBPV).
أظهرت نتائج التحاليل الجزيئية في الفاروا إصابة كل من: DWV و APBV. وكانت نسبة الإصابة (74.29٪) و (20٪) على التوالي. كان الارتباط بين DWV و Varroa معنويا (r = 76) وكان معامل التحديد 57.76٪. اما الارتباط بين ABPV و Varroa فكان غير معنوى (r = -0.34) وكان معامل التحديد 11.56٪.
زادت نسبة الإصابة بفيروسات نحل العسل المنتشرة في سوريا خلال الدراسة (2014-2017). وفقًا للتمايز الموسمي ، كان DWV أعلى نسبة إصابة 91.2٪ في الخريف ، 30.59٪ لـ ABPV في الصيف ، 15.38٪ و 21.54٪ في الربيع لـ CBPV و SBV على التوالي.
كان هناك تفاوت في الجرعة المميتة 50٪ (LD50٪) من المستخلصات النباتية المدروسة. وقد تراوحت بين 117.25 جزء في المليون / نحلة شغالة لزيت نبات A. herba-alba و 476.1 جزء في المليون / نحلة عاملة للمستخلص المائي لأوراق L. nobilis. جميع المستخلصات النباتية المدروسة لها تأثير معنوي في زيادة متوسط ووقت البقاء على قيد الحياة لنحل العسل مقارنة بالمجموعة الضابطة.
اختلف معدل الاستجابة الكلية للجهاز المناعي للنحل باختلاف مستخلص النبات وتركيزه في المختبر. وصل إلى 46.2٪ عند 20 جزء في المليون من زيت نبات A. herba-alba ، 24.6٪ عند 150 جزء في المليون من زيت نبات C. aurantium ، 9.8٪ عند 120 جزء في المليون من T. A. citriodora و 12.8٪ عند 40 جزء في المليون من المستخلص المائي من L. nobilis. كان للديفينسين أعلى معدل استجابة 38.3٪ ، يليه الأباسين 28.4٪ ، ثم غشاء البكارة بنسبة 18.5٪ ، وأخيراً الأبيداسين 14.8٪.
أثبتت ثلاثة مستخلصات نباتية ، وهي زيت نبات A. herba-alba وزيت نبات C. aurantium والمستخلص المائي لـ A. citriodora ، فعاليتها في تحفيز الجهاز المناعي للنحل في الحقل. تفاوتت معدلات الاستجابة الإجمالية بين الببتيدات. كان أعلى معدل استجابة 57.1٪ لغشاء البكارة عند استخدام المستخلص المائي من Aloysia citriodora ، 44.4٪ و 38.5٪ لـ Defensin و Abaecin على التوالي عند استخدام زيت نبات Artemisia herba-alba و 60٪ للأبيديسين عند استخدام زيت نبات الحمضيات.
ليست هناك تعليقات: