12:48 ص
الانتاج النباتي -
رسائل و أطاريج جامعية
مذكرة: تطوير طرائق الإكثار الخضري الدقيق وحفظ الأصول الوراثية لبعض أنواع السوسن البري
تم إجراء هذا البحث في مختبرات الهيئة الوطنية للتكنولوجيا الحيوية (NCBT) وكلية الزراعة خلال الأعوام 2013-2017. كان يهدف إلى تطوير تقنية في المختبر للحفاظ على المدى القصير من Iris nigricans و Iris aurantica. في هذه الدراسة ، تمت محاولة الحفاظ على الحد الأدنى من النمو باستخدام نظامين لدرجة الحرارة (3 درجة مئوية و 12 درجة مئوية) ، وأربعة مستويات من التراكيز المتوسطة MS (1 مللي ثانية ، 1/2 مللي ثانية ، 1/5 مللي ثانية و 1/10 مللي ثانية) ، ثلاثة عوامل تناضحية (سكروز ، سوربيتول و manitol) بثلاثة تركيزات مختلفة (10 ، 20 ، 30 جم / لتر) ، وحمض الأبسيسيك بتركيزات مختلفة (0.5 ، 1 ، 2 ، 3 ملجم / لتر) خالي من منظمات نمو النبات باستخدام مزارع طرف النبتة.
أظهرت النتائج أن أعلى نسبة بقاء (75٪) وأعلى معدل تكاثر (2.1) في Iris nigricans لوحظت عند استخدام تركيز 20 جم / لتر من السكروز ، بينما في Iris aurantica كانت أعلى نسبة بقاء (60.41٪). ، وأعلى معدل تكاثر (4.07) على الوسائط المحتوية على 10 جم / لتر سوربيتول بعد ثلاثة أشهر ، وأفضل تركيز متوسط كان 1/2 مللي ثانية في Iris nigricans (كانت نسبة البقاء 86.66٪) مع اختلاف معنوي مقارنة بـ 1/10 MS ( 54.44) ولكن في Iris aurantica 1/10 MS تم العثور على أفضل وسط للحفظ في المختبر (كانت نسبة البقاء 80٪) مع اختلاف معنوي مقارنة مع MS (48.89٪) ، وأعطى المستزرع المخزن عند (3c◦) أعلى نسبة بقاء (90٪ في Iris nigricans و 80٪ في Iris aurantica) وإطالة الفترة الزمنية بين عمليات النقل حتى 6 أشهر. علاوة على ذلك ، فإن المواد التي تحتوي على 3ºc plus 2mg / l ABA كان لها أعلى معدل بقاء بعد 12 شهرًا (84٪) مع اختلاف معنوي مقارنة بالمجموعة الضابطة ، حيث أعطى التركيز 0.5 مجم / لتر أعلى معدل للضرب (1.85) مع اختلاف معنوي مقارنة مع التحكم ، وأعطت مجموعة التحكم طولًا جيدًا (1.12 سم) ، ولكن عند درجة حرارة 23 درجة مئوية ، مات جميع المستزرعون بعد 12 شهرًا.
تم إنشاء تقنيات تزجيج وتغليف وتجفيف لنباتي Iris aurantica و I. nigricans لأول مرة في سوريا. في تقنية التزجيج: تم استئصال أطراف التقطير من النباتات المزروعة في المختبر وحضنت لمدة 3 أيام على وسائط Murashige و Skoog صلبة (HF-MS) مكملة بـ 0.3 M سكروز تحت ظلام تام عند 24 ± 1 درجة مئوية.
تم اختبار بعض العوامل الفعالة لتحديد أفضل الظروف في الحفظ بالتبريد مثل التركيزات المختلفة لمحلول تقشير النبات 2 (PVS2) (100٪ PVS2 لمدة 20 دقيقة ، 60٪ PVS2 لمدة 10 دقائق ، تليها 100٪ PVS2 لمدة 10 دقائق ، والزيادة التدريجية في تركيز PVS2 20 و 40 و 60 و 100٪ لمدة 20 دقيقة) ، ونوع محلول التحميل (1 مولار سكروز ، 0.4 م سكروز بالإضافة إلى 2 م جلسرين أو توليفات بين السكروز (0.5 م) و DMSO (5 أو 10٪) عند 25 درجة مئوية لمدة 20 دقيقة) ، مدة التعرض لمحلول التحميل (0 ، 15 ، 30 ، 45 ، 60 دقيقة عند 25 درجة مئوية). أظهرت النتائج أن إخضاع أطراف النبتات النيجيرية و I. aurantica للزيادة التدريجية في تركيزات PVS2 (20 و 40 و 60 و 100٪) قبل الانغماس في LN أعطت أعلى نسبة بقاء لنصائح البراعم غير المحفوظة بالتبريد (39٪ ، 30٪) ، وأطراف النبتة المحفوظة بالتبريد (75٪ ، 50٪) ، على التوالي ، أدى استخدام 10٪ DMSO مع 0. 5 مولار سكروز إلى أعلى نسبة بقاء (90٪) لإطلاق النار على القزحية السوداء غير المحفوظة بالتبريد- نصائح ، بينما نجا 30٪ فقط من أطراف إطلاق النار المحفوظة بالتبريد.
في تقنية التغليف - التجفيف ، تم استئصال أطراف اللقطة من النباتات المزروعة في المختبر وحضنت لمدة 3 أيام على نفس الوسائط الأولية الصلبة ، تم تعليق أطراف البراعم المُزروعة مسبقًا في وسط سائل HF-MS معدل يحتوي على 3 ٪ ألجينات الصوديوم و 0.3 مولار سكروز لمدة 20 دقيقة حيث تم حذف الكالسيوم من جميع مكونات الوسائط. تم أخذ أطراف التصوير بشكل فردي باستخدام ماصة مجهرية معقمة سعة 1 مل مع 200 ul من محلول ألجينات ثم غمسها في وسط سائل HF-MS مكمل بـ 100 ملي كلوريد الكالسيوم و 0.3 مولار سكروز لتشكيل حبات بقطر حوالي 5 مم والسماح للبلمرة لمدة 30 دقيقة مع التحريك المستمر. انخفض المحتوى المائي للخرز أثناء الزراعة المسبقة من 78٪ إلى 23٪ و 17٪ بعد 4 و 6 ساعات من الجفاف ، على التوالي.
لوحظ وجود علاقة بين تركيز السكروز والجفاف وتم الحصول على أعلى نسبة بقاء (67٪) عند استخدام 0.75 مولار سكروز و 4 ساعات من الجفاف مع اختلاف معنوي مقارنة بجميع المعالجات ، وزادت نسبة البقاء على قيد الحياة بسرعة من 67٪ (نصائح غير متأقلمة) إلى (77 ، 82٪) بعد 4 ، 8 أسابيع من التأقلم مع البرد ، على التوالي ، مع اختلاف كبير مقارنة بالتحكم (أطراف إطلاق النار غير المتأقلمة) ، وزادت نسبة الاسترداد من 0٪ (مجموعة التحكم) إلى 25 ، 27٪ بعد أسبوعين ، 4 أسابيع من التأقلم البارد على التوالي ، وكانت أفضل نسبة شفاء 39٪ بعد 8 أسابيع مع اختلاف معنوي مقارنة مع السيطرة. كانت النسبة المئوية لاستعادة الفروع 39٪ بعد التبريد السريع في LN ، حيث كانت 23.33٪ بعد التبريد على مرحلتين مع وجود فرق كبير في معدلات إعادة النمو.
أخيرًا ، تمت دراسة الثبات الجيني في النبات بعد الحفاظ عليه بتقنية ISSR باستخدام 22 بادئة ISSR. كان الثبات الجيني مرتفعًا (من 97 إلى 99٪) قبل وبعد الحفظ بواسطة ABA والتخزين في LN من القزحية aurantica و iris nigricans. لذلك ، وجد أن تخزين Iris L. في ABA و LN ليس له أي تأثير سلبي (اختلاف وراثي) على معدلات التجديد.
ليست هناك تعليقات: