مذكرة : توصيف بكتيريا محلية Bacillus sp و تقييم كفاءتها في مكافحة بعض حشرات رتبة حرشفيات الأجنحة Lepidoptera
Bacillus thuringiensis (Bt) هي بكتيريا إيجابية الجرام تنتج بروتينات سامة ضد أنواع مختلفة من الحشرات ، مما يجعلها الأكثر استخدامًا في مجال مكافحة الحشرات. يؤدي الاختلاف في المنطقة التي يتم عزل هذه البكتيريا منها إلى تنوع وراثي كبير واختلاف في السمية. يهدف هذا البحث إلى عزل عزلات محلية من هذه البكتيريا من مناطق مختلفة في سوريا لتشخيص وتحديد السموم المختلفة التي تنتجها هذه العزلات.
في هذه الدراسة تم تحديد 223 عزلة من أنواع العصيات ، منها 136 عزلة تم عزلها من بكتريا Bacillus thuringiensis ، معزولة عن التربة في محافظتي الرقة وحمص ، وكذلك من البيئة الجذرية لأنواع نباتية مختلفة في عدة محافظات سورية. معظمهم من محافظة درعا (63 عزلة) وحماة (35 عزلة) وأقلهم عزلة من الحسكة. اختلف توزيع هذه البكتيريا باختلاف الجذور باختلاف النباتات. تم الحصول على 36 عزلة من العدس ، 29.5٪ ، 31 عزلة من القمح ، 25.4٪ ، و 0.81٪ تم عزلها من الطماطم والتوت والجوز.
تم عزل خمس سلالات من Bacillus thuringiensis من اليرقات الميتة للكبار Galleria mellonella. تم التعرف عليهم وفقا لعينات المستعمرة البكتيرية والاختبارات البيوكيميائية والفحص المجهري. تراوح معدل الوفيات بين (83.3٪ ل B.O.4 و 53.3٪ لكلا النوعين B.O.5 و B.O.3) بعد 72 ساعة على يرقات اليرقة الثانية. تم تحديد تركيز LC50 للعزلات التي تراوحت من 103 جراثيم بلورات / مل للعزل B.O.4 ، 37x106 جراثيم بلورات / مل للعزل B.O.5 و 10x106 لعزل B.O.3.
تم اختيار 49 عزلة محلية من بكتريا (Bt) ذات نمو جيد لمستعمراتها للاختبارات الحيوية في الظروف المعملية عن طريق تغذية اليرقات الثانية والثالثة من Ephestia kuehnniella Zeller إلى السميد مع إضافة الأبواغ والبروتينات السامة. تم تسجيل أعلى معدل وفيات لليرقات بعد 24 ساعة مقارنة مع السيطرة السلبية. أظهرت النتائج أعلى معدل وفيات لليرقات (63.89٪) للعزل البكتيري رقم B115.1 المأخوذ من جذور نبات الفول بالقنيطرة.
العزلات المحلية من بكتيريا Bt سامة ليرقات فراشة البحر الأبيض المتوسط. تم التعرف على أشكال مختلفة باستخدام عدسة الزيت الغاطسة بالمجهر الضوئي العادي. كانت العزلات التي أعطت الشكل الكروي للبلورات 41.67٪ و 52.09٪ للعزلات التي لها شكل هرمي وهرمي. كانت الأشكال الثلاثة (مكعب ، هرم ، كروي) 6.25٪ وهي أكثر العزلات فاعلية على يرقات فراشة الطحين.
تم اختيار 21 عزلة محلية من Bacillus thuringiensis للكشف عن البروتينات المبردة باستخدام تقنية PCR واستخدام ثمانية بادئات. أظهرت نتائج هذا التفاعل انتشارًا أكبر للجينات من النوع Cry1 (cry1 و cry1Ac) بين العزلات بنسبة 38.10٪ يليها الجين cry3 بنسبة 14.29٪. الأقل شيوعًا هو جين cry4 ، والذي تم تسجيله بشكل منفصل. لم يتم تسجيل Cry7.8، cry2، CRY2، CRY3 بين الدراسة سلالات.
تمت دراسة تأثير التراكيز شبه المميتة لثمانية عزلات محلية من Bacillus thuringiensis على بعض مؤشرات حياة Ephestia kuehniela لجيلين ، وأظهرت تأثيرها على إطالة اليرقات ، والتغيرات في نسبة الجنس ، وحجم العذراء ، بالإضافة إلى ظهور تشوهات عند البالغين. منها. أشارت النتائج إلى تأثر نمو وتطور الحشرة أثناء التغذية المستمرة على نظام غذائي يحتوي على جرعات بتركيزات مختلفة من Bt. تم تقدير قيمة LC50 للمقايسة الحيوية الأولى للجيل الأول في المرحلة اليرقية الثانية والثالثة لمطحنة دقيق البحر الأبيض المتوسط ، والتي تراوحت بين 3.02 × 10-16 و 1.46 × 1042 لـ B177.4 و B95 على التوالي. كما أشارت النتائج إلى طول مرحلة اليرقات المدروسة مقارنة بالبكتريا غير المعالجة (الماء المقطر المعقم). لوحظ أن حجم الخادرة في كلا الجيلين أصبح أصغر ، وطول طور العذراء في الجيل الثاني كان أطول مقارنة بالتحكم السلبي.
ليست هناك تعليقات: