6:12 ص
رسائل و أطاريج جامعية -
علوم الاغذية
مذكرة: إنتاج انزيم dlPolygalacturonase بالتخمير من أنواع فطرية مسببة لعفن الثمار, واختباره في صناعة العصائر
تم الحصول على ثمانين عزلة فطرية من عفن محلي من الفاكهة ، والخضروات ، والبصل المقولب ، وأغصان المشمش ، وتم اختبار قدرتها على إنتاج البكتينازات. تم التعرف على هذه العزلات على مستوى الجنس وهي تنتمي إلى أجناس فطرية مختلفة (Penicillium - Aspergillus - Mucor Botrytis - Trichoderma - Alternaria - Monilinia). تم فحص العزلات بشكل أساسي لقدرتها على إنتاج البكتينازات باستخدام وسط Czabek-Dox Agar المعدل المحتوي على البكتين بدلاً من السكروز كمصدر وحيد للكربون ، وتم اختيار أفضل 15 عزلة وفقًا لأقطار المناطق الصافية المتكونة حول المستعمرات. تم إجراء الفحص الثانوي لهذه العزلات باستخدام طريقة DNSA ، وتم اختيار العزلة Tri4 كأفضل عزلة لإنتاج Polygalacturonase (نشاط إنزيمي 157 u / ml ، يليه Asp1 ينتمي إلى Aspergillusniger (نشاط إنزيمي 131 u / ml).
تم استخدام ثلاث ركائز تحتوي على 3 أنواع من البقايا (قشر البرتقال ، قشر الموز ، غموس التفاح) ووجد أن قشر البرتقال كان الأفضل للنشاط الأنزيمي العالي.
تم تحديد المعلمات المثلى لإنتاج polygalacturonase بواسطة Tri4 على ركيزة قشر البرتقال باستخدام التخمير المغمور ؛ أظهرت النتائج أنها كانت 30 درجة مئوية ، ودرجة الحموضة 5 ، وسرعة التهوية 150 دورة في الدقيقة ، وتركيز الركيزة 3٪ ، والحضانة لمدة 5 أيام. بينما كانت المعلمات المثلى لإنتاج polygalacturonase باستخدام التخمر في الحالة الصلبة 28 درجة مئوية ، ودرجة الحموضة 5 ، وسرعة التهوية 150 دورة في الدقيقة ، و 65٪ الرطوبة الأولية ، والحضانة لمدة 4 أيام. تمت دراسة الخواص الفيزيوكيميائية للبولي جالاكتوروناز الخام المنتج بواسطة Tri4 بالطريقة المغمورة ، أعطت درجة الحرارة 55 درجة مئوية أعلى نشاط إنزيمي عند 330 يو / مل ، وكان الإنزيم PG مستقرًا حرارياً عند 55 درجة مئوية لمدة ساعة واحدة مع 95٪ من نشاطه الأنزيمي. كانت قيمة الأس الهيدروجيني المثلى لتنشيط الإنزيم هي 5 بإعطاء 360.4 u / ml. أثرت أيونات Mn + 2 و Ag + 2 و تركيز حامض الستريك 1 ملي مولار بشكل إيجابي على النشاط الأنزيمي حيث زادت بنسبة 37٪ و 10٪ و 41٪ على التوالي ، بينما أثرت أيونات Fe + 2 سلبًا على النشاط الأنزيمي حيث انخفض بنسبة 21٪. .
تمت تنقية الإنزيم باستخدام تسخين وترسيب الأسيتون المبرد و SephacrylS-200 gel ، بحيث كان العائد الإنزيمي للإنزيم المنقى 20.7٪ ومدة التنقية 4.7. تم إلغاء الوزن الجزيئي لـ PG بواسطة SDS-PAGE وكان 29 كيلو بايت.
تم استخدام Polygalacturonas لتصفية عصائر التفاح وأفضل نتيجة يتم الحصول عليها بعد 5 ساعات عند 50 درجة مئوية وتركيز إنزيم 2.5٪ مع 0.015٪ جيلاتين.
ليست هناك تعليقات: