6:07 ص
الانتاج النباتي -
رسائل و أطاريج جامعية
كتاب : انتاج نباتات معدلة وراثيا من بعض أصناف و أصول التفاح
عدد الصفحات : 173 صفحة
كان الهدف من هذه الدراسة هو تطوير نهج فعال لتجديد النبتة المباشر من نباتات إإكسبلنتس للنباتات الخاصة بالتفاح. "Golden Delicious" و "Royal Gala" و "MM111" و "M26" rootstocks كطريقة للتكاثر النسيلي السريع وأيضًا كشرط أساسي للتحول الجيني مع الجينات المضادة للفطريات من التفاح المدروس للوصول إلى الهدف النهائي المنشود وهو إنشاء وسيلة فعالة والنهج العملي القابل للتكرار للتحول بوساطة الأجرعية التي تؤوي جين g2ps1 لأصناف التفاح ودراسات الجذر لتحسين مقاومتها الفطرية.
تم تحقيق تكوين أفرع عرضية من قطع أوراق التفاح التي تمت دراستها باستخدام شرائح الأوراق الوسطى المأخوذة من أصغر الأوراق من النباتات المزروعة في المختبر. أدت الظروف المثلى للتكوين العضوي "المباشر" إلى كفاءة تجديد عالية تصل إلى 90٪ ، 95٪ ، 92٪ ، 94٪ إنتاج فرع أو أكثر لكل نبات مع معدلات تجديد عالية تبلغ 4.5 ، 5.6 ، 4.0 و ، 4.1 فسائل جديدة في الدراسة. التفاح على التوالي على وسط قاعدي MS مع فيتامينات B5 ، 1.0 جم / لتر MES ، 2.0 مجم / لتر TDZ مع 0.2 مجم / لتر NAA. بينما ، لا يمكن ملاحظة أي تجديد على الوسائط الخالية من السيتوكينينات.
كانت القدرة العضوية لقطع الأوراق مرتبطة بنضج الأوراق وأصل قطعة الورقة مع أصغر الأوراق المتوسعة ذات اللون الأخضر الفاتح والتي تكون أكثر تجددًا من الأوراق القديمة. كانت قطاعات الأوراق الوسطى أكثر استجابة من الجزء العلوي أو السفلي من الورقة. تم تجديد البراعم العرضية من الجوانب المقطوعة وأسطح الأوراق. لذلك ، تم استخدام أجزاء الورقة الوسطى بعد ذلك لتكوين الأعضاء باستخدام أنسجة أوراق تفاح الدراسات. تتكون وسائط التجديد الأكثر كفاءة من: MS + B5 vit. + 1.0 جم / لتر MES + 30 جم / لتر سكروز + 1 مجم / لتر BAP + 0.3 مجم / لتر IBA + 0.2 مجم / لتر GA3 + 6 جم / لتر أجار
تم إجراء الثقافات الفرعية كل 4 أسابيع لتوفير كمية كافية من الأوراق اللازمة للتحول.
تم تحسين ظروف التحول الجيني للتفاح المدروس باستخدام الجين g2ps1 من ترميز Gerbera hybrida لـ 2-pyrone synthase الذي يساهم في مقاومة الفطريات والحشرات. يمكن الحصول على براعم معدلة وراثيًا مفترضة على وسائط MS مع فيتامينات B5 ، أو 5.0 مجم لتر -1 BAP ، أو 2.0 مجم لتر -1 TDZ مع 0.2 مجم لتر -1 NAA في وجود عامل الاختيار "PPT" عند 3.0 مجم لتر -1.
تم تحقيق مضاعفة البراعم المعدلة وراثيًا على: فيتامينات MS + B5 + 1.0 مجم لتر -1 BAP + 0.3 مجم لتر -1 IBA ، 0.2 مجم لتر -1 GA3 + 1.0 جم / لتر MES + 30 جم / لتر سكروز + 7.0 جم / لتر Agar ، مع عامل الاختيار PPT عند 3 مجم لتر -1 وتم تربيته الفرعية كل 4 أسابيع من أجل الحصول على مادة كافية لتأكيد تحول البراعم المفترضة التي تم الحصول عليها.
تم الحصول على الحيوانات المستنسخة المعدلة وراثيًا من التفاح المدروس على التوالي وتأكيدها عن طريق الانتقاء على الوسائط التي تحتوي على عامل الاختيار "PPT" وعن طريق تحليل PCR باستخدام البادئات المناسبة في جميع الحيوانات المستنسخة التي تم الحصول عليها من أجل وجود جين شريط الانتقاء (447 نقطة أساس) و الجين المهم "g2PS1" (1244 نقطة أساس) بكفاءة تحويل 0.4٪ ، 0.6٪ ، 0.1٪ و 0.3٪ على التوالي.
كما أثبتت نتائج تحليل تسلسل الحمض النووي للنباتات المعدلة وراثيا التحول الناجح وكان لها 97 إلى 99٪ من التماثل المتسلسل مع gerbera hybrida mRNA للجين 2-pyrone synthase g2ps1 . تمت مضاعفة هذه الحيوانات المستنسخة المعدلة وراثيًا بشكل أكبر وتجذيرها في المختبر عن طريق نقل أطراف إطلاق النار بطول 2-3 سم إلى تأصيل ½ وسط قاعدي MS مكمل بـ 1.0 مجم / لتر من حمض الإندول -3 الزبد (IBA) ، في وجود عامل الاختيار 'PPT ". تم تأقلم النباتات المحورة وراثيًا الجذور بنجاح ويتم الاحتفاظ بها تحت ظروف الاحتواء وفقًا لقانون السلامة البيولوجية في سوريا لتقييم أدائها لمقاومة الفطريات.....
------------------
----------------------------
ليست هناك تعليقات: