1:27 ص
الانتاج النباتي -
كتب الزراعة
كتاب : محاضرات عملية حول زراعة الانسجة النباتية
يعتبر التكاثر الدقيق للنباتات تقنية مهمة ، وضرورية في كثير من الأحيان ، للحفظ بالتبريد لنباتات التكاثر الخضري. زراعة الأنسجة النباتية هي طريقة سريعة وفعالة لتكاثر الأنسجة والخلايا النباتية لإنتاج المنتج المطلوب. تعتبر مزارع الشتلات مصدرًا حيويًا للإكسبلنتس للعديد من طرق الحفظ بالتبريد لأطراف البراعم ، وغالبًا ما يتم معالجة نصائح البراعم مسبقًا واستعادتها باستخدام وسط مغذي اصطناعي. إن صياغة وتحضير وسائط زراعة الأنسجة النباتية ليست صعبة ولكنها تتطلب بعض التخطيط والمعدات الخاصة.
عند التخطيط لإعداد وسائط زراعة الأنسجة النباتية ، يجب مراعاة الغرض من جهود زراعة الأنسجة ، وأنواع النباتات التي يتم استزراعها والنتائج المرجوة. مراحل زراعة الأنسجة النباتية هي: الاختيار / التحضير (المرحلة 0) ، البدء / التأسيس (المرحلة 1) ، الضرب (المرحلة 2) ، التجذير (المرحلة 3) ، التأقلم / التصلب (المرحلة 4). يتم اختيار صيغة لوسط النمو بناءً على المرحلة التي يدخل فيها النبات أو سيدخله. بشكل عام ، من الأفضل إجراء بحث في الأدب ، على سبيل المثال من كتاب أو مقالات في المجلات العلمية ، لمعرفة ما إذا كانت هناك معلومات متاحة بشأن المصنع المستهدف محل الاهتمام ، والوسائط المقترحة لهذا النبات ، والنتائج التي تم الحصول عليها.
يمكن أن يكون لصياغة وسائط زراعة الأنسجة النباتية تأثير عميق على نمو النبات وتطوره. هناك العديد من التركيبات المختلفة التي تم تطويرها على مر السنين للعديد من الأنواع النباتية ، ولكن القليل منها يستخدم بشكل أكثر شيوعًا للجزء الأكبر من عمل زراعة الأنسجة النباتية. تعد تركيبة Murashige & Skoog (1962) هي الوسيلة الأساسية الأكثر شيوعًا المستخدمة اليوم إلى حد بعيد ، ولكن هناك وسائط فعالة أخرى مستخدمة بشكل متكرر. وتشمل هذه التقارير التي نشرها White ، "Gamborg’s B-5" بواسطة Gamborg et. آل. ، Schenk and Hildebrandt يمكن تصنيع تركيبات الوسائط هذه إما من محاليل مخزون سائلة من الأملاح والفيتامينات أو شراؤها كحزم ممزوجة مسبقًا في شكل مسحوق.
هناك العديد من المكونات والإضافات التي يمكن استخدامها في وسط التكاثر الدقيق للنبات ، ولكن يمكن تصنيف معظمها في ثماني فئات: الماء ، والأملاح المغذية (المغذيات الدقيقة والكبيرة) ، والفيتامينات ، والأحماض الأمينية ، والكربوهيدرات ، وعوامل التبلور ، ومنظمات النمو (الهرمونات) ، والمكملات العضوية الأخرى. فيما يلي ملخص لكل فئة مكونة:
♦ الماء- وسائط الاستزراع النباتي أساسها الماء ، وتشكل بشكل عام 90 +٪ من إجمالي المكونات. من المهم استخدام المياه فائقة النقاء حتى لا تؤثر أي معادن أو شوائب أخرى على نمو النبات. يتم تحقيق ذلك إما عن طريق التقطير أو التناضح العكسي.
♦ الأملاح المغذية - توفر الأملاح المغذية العناصر "الكلية" و "الدقيقة" اللازمة لنمو النبات. المغذيات الكبيرة المقدار مطلوبة بكميات أكبر (1-60 ملي مولار) وتشمل النيتروجين والفوسفور والبوتاسيوم والكالسيوم والمغنيسيوم والكبريت. المغذيات الدقيقة مطلوبة بكميات أقل (0.1-100 ميكرومتر) وتشمل الحديد والمنغنيز والزنك والبورون والنحاس والموليبدينوم والكوبالت واليود. يضاف الصوديوم والكلور أيضًا إلى بعض الوسائط ولكن لا يعتبران ضروريين لنمو النبات. تضاف المغذيات الكبيرة والصغرى إلى الوسط عمومًا على شكل أملاح في صورة يسهل استخدامها من قبل النباتات. تشمل أمثلة الأملاح الغذائية نترات الكالسيوم وكلوريد البوتاسيوم وكبريتات المغنيسيوم. يُضاف الحديد والزنك أحيانًا في شكل مخلّب للمساعدة في توافر هذه العناصر وتجنب ترسبها. تشمل العوامل المخلبية الشائعة EDTA أو EDDHA.
الفيتامينات- غالبًا ما تفتقر النباتات التي تزرع في الفيتامينات إلى القدرة على تصنيع الفيتامينات ، على عكس النباتات التي تزرع في التربة أو الركائز الأخرى. يتم إضافة الفيتامينات المختلفة كمكملات لوسائل زراعة الأنسجة النباتية لتوفير مركبات تعمل على تحفيز وظائف التمثيل الغذائي معينة. تستخدم مكملات الفيتامينات بشكل عام بمعدلات 0.1-10 مجم / لتر وتشمل الثيامين وحمض النيكوتينيك والبيريدوكسين وميو-إينوزيتول.
♦ الأحماض الأمينية- تضاف بعض الأحماض الأمينية إلى وسط زراعة الأنسجة النباتية ويمكن أن تكون مفيدة لنمو الخلايا النباتية لأنها مصدر متاح بسهولة للنيتروجين يسهل على النباتات امتصاصه في بعض الأحيان أكثر من المصادر غير العضوية. يمكن إضافة مخاليط الأحماض الأمينية ، مثل الكازين المتحلل ، أو الأحماض الأمينية المفردة ، مثل الجلايسين ، الجلوتامين ، أو الأدينين ، إلى الوسائط بمعدلات متفاوتة تتراوح من 2-1000 مجم / لتر.
♦ الكربوهيدرات - معظم النباتات المختبرية غير قادرة على إنتاج الكربوهيدرات الخاصة بها من الضوء والماء وثاني أكسيد الكربون ، كما هو الحال في العالم الطبيعي. يجب توفير مصدر الكربوهيدرات لوسط نمو النبات. مصدر الكربوهيدرات الأكثر استخدامًا هو السكروز ، ولكن يتم استخدام الجلوكوز والفركتوز والمالتوز أيضًا بمعدلات 20-30 جم / لتر. يختلف تأثير مصدر الكربوهيدرات والكمية المستخدمة في الوسط باختلاف أنواع النباتات.
♦ عوامل التبلور- عادة ما يتم تكميل وسط زراعة الأنسجة النباتية بعامل التبلور أو خليط من عدة عوامل. الغرض من عوامل التبلور هو توفير الدعم المادي للنبات الذي يتم استزراعه. Agar (المشتق من الطحالب الحمراء Gracilaria) هو عامل تبلور متكرر ، لكن صمغ الجلان (المشتق من بكتيريا Sphingomonas) يستخدم أيضًا بمفرده أو بالاشتراك مع أجار. Agarose (المستخرج من أنواع معينة من الأعشاب البحرية الحمراء) يستخدم بدرجة أقل ، خاصة في زراعة حبوب اللقاح. قد يكون نمو الأنواع النباتية المختلفة أفضل باستخدام عامل تبلور معين أو مزيج من عدة أنواع ، لذلك يوصى بإجراء الاختبار. في بعض الحالات ، قد تختلف استجابات النبات اعتمادًا على الشركة المصنعة أو نقاء عامل التبلور. إذا لم يتم استخدام عامل التبلور ، كما هو الحال بالنسبة لمزارع الخلايا المعلقة ، فقد يكون إما الاهتزاز المستمر للثقافة على منضدة شاكر أو ، في حالة مزارع النبتة ، نظام دعم من نوع ما (مثل "طوف" ورقي) من الضروري....
--------------------
-------------------------------
ليست هناك تعليقات: