1:39 ص
البيولوجيا
كتاب : حفظ مزارع الخلايا الحية
اعداد : د زهرة محمود الخفاجي
تقديم الفهم الحالي للقضايا والأساليب المتعلقة بحفظ وتخزين مزارع الخلايا المستخدمة في العمليات الحيوية الصناعية. من أجل أن تكون بمثابة أدوات مفيدة في التكنولوجيا الحيوية ، يجب الحفاظ على مزارع الخلايا وتخزينها بشكل صحيح لضمان بقاء خصائصها البيولوجية دون تغيير. على الرغم من ذكر طرق أخرى ، مثل التجفيد ، يركز على استخدام درجات الحرارة شديدة البرودة لحفظ الخلايا وتخزينها بطريقة التبريد. تمت مناقشة ثلاث فئات رئيسية من الخلايا - الخلايا الميكروبية والنباتية والحيوانية. يوفر هذا الفصل فرصة للقارئ لمراجعة القضايا التقنية والجودة والتنظيمية الحالية التي تؤثر على استخدام هذا الطيف البيولوجي الواسع للخلايا ، والتي تُستخدم حاليًا كأدوات للتكنولوجيا الحيوية. يركز هذا الفصل على الحفظ بالتبريد لمزارع الخلايا هذه - أي الحفاظ على قابلية الخلية للحياة والخصائص البيولوجية من خلال تطبيق منهجيات التجميد.
الزراعة المعلقة للخلايا النباتية المعزولة هي أداة لا تقدر بثمن لتوفير المواد للدراسات عالية الإنتاجية مثل التحليلات الأيضية ، وإنتاج المنتجات النباتية الثانوية ، واكتشاف مبيدات الأعشاب. إنه يتيح إجراء تجارب سهلة على مجموعة متجانسة من الخلايا من الناحية الفسيولوجية والكيميائية الحيوية. تم وصف طرق مختلفة لزراعة كميات كبيرة من الخلايا النباتية في وسط المغذيات السائلة (NM) لفترة طويلة . تعتمد هذه الطرق على الثقافة الفرعية للمعلقات الخلوية التي وصلت إلى هضبة النمو عندما يتم استقلاب معظم العناصر الغذائية المضافة في البداية إلى NM ، وخاصة الكربوهيدرات. إنه يؤدي إلى أكثر أو أقل من مجموعات الخلايا المتجانسة وعادة ما يؤدي إلى تأخير النمو (مرحلة التأخر) بعد الثقافة الفرعية . لقد ثبت أن الحصول على مزارع تعليق خلية متجانسة يتطلب جهازًا متطورًا مثل المواد الكيميائية التي تعمل على تحسين نمو الخلايا العصبية ونمو الخلايا . بدلاً من ذلك ، تنتج الثقافات الفرعية كل يوم أو يومين أيضًا مجموعات خلايا متجانسة ، ولكنها تنطوي على الكثير من المناولة والصيانة التي يصعب بالتالي إجراؤها على مدى فترات زمنية طويلة.
لهذا السبب ، تم اقتراح إجراءات بديلة للحفاظ على ثقافات تعليق الخلية المحسّنة حديثًا ، بشكل مثالي لفترات غير محددة. بصرف النظر عن صيانة الكالس الخلوي على الوسائط الصلبة التي تؤدي إلى تأخيرات ملحوظة لبدء مزارع تعليق الخلية المتجانسة ، فإن معظم الإجراءات تعتمد على التحكم في التجميد / الذوبان والتخزين في النيتروجين السائل . ومع ذلك ، فإن صلاحية الخلايا بعد فك التجميد تكون منخفضة بشكل عام ، ويذكر المؤلفون دائمًا مراحل تأخر طويلة قبل التعافي الكامل لنمو ثقافة الخلية. لوحظ أعلى قابلية للبقاء (حتى 90٪) من قبل Menges and Murray بعد الحفظ بالتبريد لخلايا نبات الأرابيدوبسيس والتبغ في وجود DMSO والسوربيتول. ومع ذلك ، حتى في هذه الحالة ، يستغرق الأمر أسبوعًا واحدًا على الأقل حتى تستعيد الخلايا النمو الطبيعي بعد الذوبان وإعادة التكوين الكامل ، وهناك خطر من أن خطوط الخلايا المحفوظة قد تختلف عن الخطوط الأصلية .....
-------------------
--------------------------------
ليست هناك تعليقات: