2:18 ص
علوم الاغذية -
كتب الزراعة
كتاب : الأحياء الدقيقة في الاغذية و التقنيات الحديثة في الكشف عنها
تأليف : د فايز العاني
عدد صفحات الكتاب : 404 صفحة
يمكن استخدام تقنيات مختلفة لتحديد الكائنات الحية الدقيقة في الغذاء.
يعطي البعض منهم العدد الإجمالي (قابل للحياة + غير قابل للتطبيق) بينما يعطي البعض الآخر عددًا قابلاً للتطبيق فقط.
1. عدد الألواح القياسي (SPC):
يعطي عدد الصفائح القياسي عددًا قابلاً للتطبيق من الكائنات الحية الموجودة في الطعام.
الإجراء الخاص بأداء عدد الألواح القياسي مذكور أعلاه في الشكل. يتم تحديد عدد الكائنات الحية في الغذاء الأصلي عن طريق عد المستعمرة على لوحة أجار. افتراضان رئيسيان لـ SPC هما:
يتم فصل الكائنات الحية الدقيقة في المعلق كخلية واحدة بحيث يتم تطوير كل مستعمرة من خلية واحدة. سوف تتكاثر جميع الخلايا القابلة للحياة الموضوعة على الوسط وتنتج مستعمرة وقت الحضانة ودرجة الحرارة لمختلف الكائنات الحية الدقيقة:
Psychrophilesà 7oC ، 7 أيام
Mesophilesà 35 درجة مئوية ، 24-48 ساعة
Thermophilesà 55 درجة مئوية ، 48 ساعة
مزايا:
إنه يعطي عددًا قابلاً للتطبيق.
إنه حساس للغاية ، أي أنه يمكن حساب عدد الميكروبات المنخفضة للغاية والعالية.
سلبيات:
إذا لم يكن المعلق متجانسًا ويحتوي على مجموع الخلايا ، فسيكون عدد المستعمرات أقل من العدد الفعلي للكائنات الحية الدقيقة.
إذا كان المعلق يحتوي على أنواع مختلفة من الكائنات الحية الدقيقة ، فلا يمكن أن تنمو جميعها في نفس الوسط وتحت نفس الحالة.
أنواع طريقة عد الألواح القياسية (SPC):
تقنية لوحة الصب:
في هذه الطريقة ، يتم تخفيف الطعام أولاً بشكل متسلسل في مادة مخففة مناسبة. بعد ذلك ، يتم وضع الحجم المقاس للعينة من الأنبوب المخفف في الصفيح. يتم خلط الأجار المذاب عند 44-45 درجة مئوية معه. بعد الخلط المتجانس للعينة مع أجار ذائب ، يتم الاحتفاظ بها للتصلب. ثم يتم تحضين لوحات بتري في الوقت المناسب ودرجة الحرارة.
يتم تحديد لوحة تحتوي على مستعمرات بين 30-300 ويتم عد عدد المستعمرات.
نظرًا لأن نفسية النفس لا يمكنها تحمل درجة حرارة الأجار الذائب ، فإن هذه التقنية ليست مناسبة لهم. في هذه الطريقة ، يتم تطوير كل من المستعمرات السطحية والجوفية.
يصعب عزل المستعمرات تحت السطحية.
تقنية لوحة الانتشار:
في هذه الطريقة ، يتم وضع عينة مخففة بشكل مناسب على سطح أجار صلب. ثم يتم توزيع قطرة العينة على سطح أجار باستخدام قضيب زجاجي مثني. يتم تحضين الصفيحة لوقت ودرجة حرارة كافيين ، ثم يتم حساب عدد المستعمرات. يتم حساب العدد أو الكائنات الحية بطريقة مماثلة لتقنية لوحة الصب. هذه الطريقة مناسبة للمذنبين النفسيين أيضًا ويتم تطوير المستعمرات السطحية فقط.
تقنية لوحة الخط:
في هذه التقنية ، يتم استخدام حلقة نقل لنشر الحجم المحدد للعينة على سطح أجار صلب.
يتم النقل عن طريق حلقة معايرة ذات حجم معين. في بعض الأحيان ، يمكن استخدام الوسائط الانتقائية والتفاضلية لاختيار نمو كائن حي معين.
2. تقنية مرشح الغشاء:
هذه التقنية مهمة بشكل خاص لتحليل الكائنات الحية الدقيقة في الأطعمة السائلة التي يكون المحتوى الميكروبي فيها منخفضًا جدًا. في هذه الطرق ، يتم ترشيح الحجم الرئيسي المقاس للسائل من خلال مرشح غشائي لمسامية محددة. ثم يتم إزالة وسادة الترشيح ووضعها على سطح لوحة أجار ثم تحضينها. تنمو الكائنات الحية الدقيقة على سطح مرشح الغشاء لتشكيل مستعمرة. ثم يتم حساب العدد الإجمالي للكائنات الحية في العينة الأصلية. يمكن استخدام وسائط أجار المغذية أو الانتقائية لنمو الميكروبات.
3. طريقة الرقم الأكثر احتمالاً (MPB):
إنها تقنية إحصائية لتحديد عدد الكائنات الحية في العينة. يعطي الرقم الأكثر احتمالا ولكن ليس الرقم الفعلي. لوحظ التعكر وإنتاج الغاز وإنتاج الحمض لتحديد الكائنات الحية الدقيقة. تعتمد هذه الطريقة على 3 خطوات:
الاختبار الافتراضي
اختبار مؤكد أو تأكيدي
اختبار مكتمل
4. العد المجهري المباشر (DMC):
في هذه الطريقة ، لا يوجد فرق بين الخلايا الميتة والقابلة للحياة. يتم عد الخلايا الإجمالية. في هذه الطريقة ، يتم الحصول على النتيجة بشكل أسرع من معظم الطرق الأخرى لأن فترة الحضانة غير مطلوبة. في حالة الطعام السائل ، يتم إجراء مسحة مباشرة. بالنسبة للأطعمة الصلبة ، يجب أولاً تقسيمها حتى 10-1. يجب نزع الدهن عن الأطعمة الدهنية في زيلين أو أسيتون لتحضير اللطاخة. ثم تتم إزالة الزيلين / الأسيتون عن طريق غمسه في الإيثانول. في هذه الطريقة ، يتم حساب عدد الكائنات الحية الدقيقة في المجال المجهري مباشرة. تستخدم هذه التقنية على نطاق واسع لتقييم جودة الحليب الخام ومنتجات الألبان الأخرى.
طريقة عدد السلالات:
إنه مثال على العد المجهري المباشر. تم تطوير هذه الطريقة في البداية بواسطة R.S Breed. في هذه الطريقة ، يتم نشر عينة 0.01 مل على مساحة 1 سم مربع على الشريحة. إذا كانت العينة دهنية ، فيجب إزالة الدهن منها بالزيلين أو الأسيتون.
ثم تتم إزالة الزيلين الزائد أو الأسيتون عن طريق غمسه في الإيثانول. ثم يتم تجفيف الشريحة وتثبيتها وتلطيخها بالصبغة المناسبة ويتم ملاحظتها تحت المجهر. يتم حساب متوسط عدد الكائنات الحية الدقيقة في كل حقل. ثم يتم تحديد مساحة المجال المجهري التي يتم من خلالها حساب عدد الكائنات الحية الدقيقة في العينة الأصلية. ليس من العملي حساب الحقل بأكمله. لذلك ، يتم حساب عدد قليل فقط من الحقول المجهرية لتحديد متوسط عدد الكائنات الحية في العينة.
5. العداد الإلكتروني:
في هذه الطريقة ، يتم وضع الحجم القياسي للتخفيف المناسب للتعليق في عداد إلكتروني. تحتوي الآلة على فتحة صغيرة يمكن للكائنات الحية الدقيقة أن تمر من خلالها. يتسبب مرور الكائنات الحية الدقيقة من خلال الفتحة في حدوث تغير في المقاومة الكهربائية عبرها والتي يتم تسجيلها على شكل نبضات. يتم حساب هذه النبضات بواسطة دارة مناسبة في العداد. يتم استخدام عدد النبضات من الحجم الثابت للعينة لحساب عدد الكائنات الحية في عينة الغذاء الأصلية.
6. اختبار تقليل الصبغة:
يتم استخدام صبغتين بشكل شائع في اختبار تقليل الصبغة لتقدير العدد القابل للحياة من الكائنات الحية. اختبار اختزال الميثيلين الأزرق: يستخدم اختبار اختزال الميثيلين الأزرق بشكل شائع لتحديد عدد الكائنات الحية في الحليب الخام. في هذه الطريقة ، يتم خلط الميثيلين الأزرق مع الحليب الخام أو المحتضن. تعمل الكائنات الحية الدقيقة الموجودة في الحليب على تقليل لون الميثيلين الأزرق لتكوين leucomethylene blue بحيث يصبح الحليب أزرق إلى عديم اللون. يشير وقت إزالة لون الحليب إلى عدد الكائنات الحية. إذا كان عدد الكائنات الحية أعلى ، فسيتم إزالة اللون في وقت أقصر والعكس صحيح. في هذه الطريقة يتم تقييم الجودة الميكروبية للحليب عن طريق تقليل الوقت.
اختبار تقليل ريسازورين (اختبار سريع):
إنه مثال على استخدام اختبار تقليل الصبغة السريع لتحديد عدد الكائنات الحية القابلة للحياة في الغذاء مثل الحليب الخام. في هذا الاختبار ، يتم خلط صبغة ريسازورين مع الحليب الخام. تقلل الكائنات الحية الدقيقة الموجودة في الحليب من الريسازورين بحيث يتغير لونه من الأزرق القديم إلى الوردي أو عديم اللون. إذا كان عدد الكائنات الحية الدقيقة أعلى ، يتم تقليل الصبغة في وقت أقصر و vieversa لذلك ، يمكن التنبؤ بالحمل الجرثومي للحليب عن طريق تقليل وقت ريسازورين. في هذه الطريقة ، يتم الحصول على النتيجة في غضون 10 دقائق.
مزايا اختبار تقليل الصبغة:
إنه اختبار بسيط وأسهل وغير مكلف. فقط الخلايا القابلة للحياة تقلل الصبغة بشكل فعال. لذلك ، يمكن التنبؤ بهذا العدد من الكائنات الحية القابلة للحياة. عيوب اختبار تقليل الصبغة: لا تقلل كل الكائنات الدقيقة الصبغة بالتساوي. لا تنطبق على الأطعمة التي تحتوي على مواد مختزلة مثل تقليل الإنزيمات ما لم يتم اتباع خطوات خاصة.....
--------------------
محتويات الكتاب :
--------------------
----------------------------
ليست هناك تعليقات: